催吐萝芙木脂溶性生物碱提取工艺研究

催吐萝芙木脂溶性生物碱提取工艺研究

　　1、材料

　　催吐萝芙木干根（海南省五指山市海南制药厂提供）。冰醋酸、醋酸酐、高氯酸、硫酸银、氯化钡、雷氏铵盐等均为分析纯，95%的酒精为工业级。

　　BT244S型电子天平（德国Sartorius）；RE-52-CS型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；DZF-6020型真空干燥箱（上海博迅实业有限公司）。

　　2、方法与结果

　　2.1 萝芙木生物碱的提取催吐萝芙木干根经粉碎，过40目筛后真空干燥。考虑到不破坏萝芙木提取物的生物活性，本实验在温水浴条件下采用工业酒精浸渍法。提取液经减压浓缩，回收乙醇得浸膏。

　　2.2 水溶性生物碱含量的测定雷氏铵盐在酸性介质中可与大部分的生物碱生成沉淀。因此本试验将提取物用稀酸水溶解并调pH=2，加入新鲜配制的雷氏铵盐饱和水溶液，滤出生成的生物碱雷氏盐沉淀，用少量冰水洗涤1～2次，抽干。将沉淀溶于丙酮，滤除不溶物，再向生物碱雷氏盐丙酮溶液中加入硫酸银饱和水溶液，使生物碱雷氏盐分解，生成生物碱硫酸盐和雷氏银盐沉淀，过滤后再向滤液中加入计算量的氯化钡溶液，生成生物碱盐酸盐和硫酸钡沉淀，过滤，滤液蒸干得生物碱盐酸盐，称重。萝芙木生物碱的药用形式多为水溶性盐［7］，因此本实验以沉淀法得到的盐酸盐的量作为提取物中水溶性生物碱的量。

　　2.3 统计分析采用SAS（STATISTICAL ANALYSIS SYSTEM）8.0统计软件进行数据处理，以GLM过程做总模型方差分析，从而选择较优提取条件。

　　2.4 提取条件的优选 称取催吐萝芙木粗粉20 g，根据影响溶剂提取的主要因素，选择溶剂用量（A）、提取时间（B）、提取溶液的pH条件（D）作为考察因素，每个因素根据实际情况取3个水平，按L9（34）表进行正交实验，分别按“2.1项”下所述方法制得浸膏。以提取物中的生物碱盐酸盐为指标，采用SAS 8.0统计软件进行统计分析。正交实验表头设计见表1，实验结果及处理数据见表2～3。

　　正交实验结果经方差分析，各提取因素对提取效果均有显着影响，其中pH条件影响较显着，提取时间和溶剂用量次之。分别对各因素不同水平做差异显着性分析，可知A2与A3，C2与C3皆无显着性差异，其余两两之间差异显着。根据正交实验结果，结合大生产可能性，并从降低成本角度考虑，最终确定提取工艺为A2B1D1，即药材粉碎成细粉，加10倍量95%的工业酒精在pH为2的条件下，浸提5 h。经过滤，浓缩，回收乙醇，制得浸膏。

　　2.5 最佳工艺条件的验证以正交实验的最佳工艺参数进行验证试验，结果如表4。可知，应用优化后的工艺进行提取试验，每100 g生药提取后能制得12.8 g水溶性生物碱盐酸盐。3次所得提取物中生物碱盐酸盐的量基本平行，说明此工艺条件重复性好。传统的醇提工艺大多直接以工业酒精浸渍3～7 d，优化后的提取工艺只需5 h，生物碱盐酸盐的提取率可达12.8%。

　　3、结果

　　催吐萝芙木中的脂溶性生物碱进行了大量研究，发现了一系列的单萜吲哚类生物碱［2～5］。催吐萝芙木原产于西非加纳，是萝芙木中的优良品种，其干燥根及茎是我国重要的南药，具有清风热、降肝火、消肿解毒的作用，是降压药利血平的主要天然来源［6］。正交实验结果表明，提取溶剂的pH条件对提取水溶性生物碱影响最大，提取时间次之，溶剂用量影响最小。在A3B1D1条件下，溶剂用量稍大，成本过高，故选择A2B1D1为最佳提取工艺条件。

　　本实验旨在优化水溶性生物碱的提取工艺，首次采用雷氏铵盐沉淀法从催吐萝芙木浸膏中获得生物碱盐酸盐。由于萝芙木生物碱的药用形式多为水溶性盐，因此以沉淀法得到的盐酸盐作为考察指标，具有一定的现实意义。传统的醇提工艺大多直接以工业酒精浸渍3～7 d，而在本工艺条件下，通过调节工业酒精的pH值，加入酸作为浸提辅助剂，提高了浸提效能，大大地缩短了浸提时间。