生物试剂方
生物试剂篇一：生物试剂配方
生物试剂配方
一，健那绿：1,）1%健那绿：0.5g+50ml生理盐水
2）1/5000健那绿染液：取1%的健那绿1ml加入49ml生理盐水=20ml健那绿+980mll生理盐水
二，吡罗红甲基绿：A液：1）甲基绿2g+98ml水
2）吡罗红G5g+95ml水
3）取60ml甲基绿与20ml吡罗红加入到160ml水，放入棕色瓶备用。
B液：1）乙酸钠16.4g,加水至1000ml
2）乙酸12ml，加水至1000ml
3)乙酸钠溶液300ml+稀乙酸200ml+500ml水
吡罗红甲基绿试剂：A液200ml+B液800ml
三．牙签消毒：KMno4溶液，取0.1g~0.5g高猛酸钾溶于100蒸馏水中
四．生理盐水：0.9%：取9g盐溶于1000ml水中
五．30%蔗糖溶液：300g蔗糖加水至1000ml
六．1g龙胆紫溶于100ml水，稀释到500ml，存于棕色瓶中。
七．斐林试剂：甲液：100g氢氧化钠(NaOH)加水至1000ml
乙液：50gCuSO4加水至1000ml
苏丹：1g干粉加95%酒精至1000ml
双缩脲：A液：同甲液B液：10gCuSO4加水至1000ml
八．淀粉酶：2%：20g酶+980ml水
淀粉3%：30g淀粉+970ml水
蔗糖3%：30g糖+970ml水
过氧化氢（H2O2）3%：100ml（30%H2O2）+900ml水
3.5%FeCl3：35g(Fecl3)+965ml水
15%HCL：202ml(37%HCL)加水至500ml
九．层析液：石油醚+丙酮+苯20:2:1=1000:100:50
生物试剂篇二：生物试剂配制标准操作流程
生物试剂配制标准化操作流程
1.目的
确保试剂配制准确、有效。
2.范围
试剂研发部芯片组所用的生物试剂。
3.器材与试剂
3.1.器材
电子天平，称量匙，称量纸，移液枪，涡旋混合器，掌上离心机，磁力搅拌器，转子，玻璃棒，1L容量瓶，50ml容量瓶，100ml容量瓶，10ml容量瓶，1L烧杯，100ml烧杯，10ml烧杯，100ml量筒，10ml量筒，0.2μm孔径滤膜，1ml注射器，1.5ml离心管。3.2.试剂
EDC：1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimideHydrochloride，1-乙基-3-(3-甲基氨基丙基)碳化二亚胺，(191.7)，密封、干燥、-20℃避光密闭保存。MES：2-(N-Morpholino)ethanesulfonicacid，2-(N-吗啉代)乙磺酸，(213.2)，室温干燥密闭保存。
Formamide：甲酰胺，(45.041)，4℃密闭保存。
10g/mlSalmonDNA：鲑鱼精DNA，室温干燥密闭保存。
SDS：dodecylsulfate，十二烷基硫酸钠，(288)，室温干燥密闭保存。1mol/LNaOH：氢氧化钠，(40.01)，室温密闭干燥保存。
柠檬酸三钠·2H2O：Trisodiumcitrate，dihydrate，(294.1)，室温干燥密闭保存。NaCl：氯化钠，(58.44)，室温干燥密闭保存。1mol/LHCl：盐酸，(36.5)，室温密闭保存。
4.程序
4.1.MES(20mM，2×)配制：
4.1.1.配制0.1MMES母液
4.1.1.1.在干燥环境中用电子天平称取1.21524gMES于干净的100ml烧杯中。4.1.1.2.量取30ml蒸馏水溶解MES固体，加入数滴1mol/LNaOH调节pH至5.1。4.1.1.3.把溶液转移到已经检查过的50ml容量瓶中，用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，洗涤液也转移到容量瓶中，轻轻摇动，用玻璃棒引流，加蒸馏水定容至50ml。
4.1.2.配制20mMMES
4.1.2.1.于无菌操作台内稀释0.1MMES母液至20mM(2ml0.1M母液+8ml无菌水，即2×)，分装至1.5ml离心管，全程无菌过滤，-20℃保存。
4.2.SSC洗液配制：
4.2.1.20×SSC(1L)洗液配制：
4.2.1.1.在干燥环境中用电子天平称取175.3g(3M)NaCl和88.2g(0.3M)柠檬酸三钠·2H2O于1L的烧杯中。
4.2.1.2.量取800ml去离子水溶解NaCl与柠檬酸三钠·2H2O，加入数滴1mol/LNaOH溶液调pH值至7.0。
4.2.1.3.把溶液转移到已经检查过的1L容量瓶中，用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，洗涤液也转移到容量瓶中，轻轻摇动，用玻璃棒引流，加水定容至1L，分装后高压灭菌，室温密闭存放。4.2.2.10%SDS(100ml)配制：
4.2.2.1.在干燥环境中用电子天平称取10gSDS。4.2.2.2.量取80ml去离子水加热溶解10gSDS。
4.2.2.3.待溶液冷却至室温，加入数滴1mol/LHCl调pH至7.2。
4.2.2.4.把溶液转移到已经检查过的100ml容量瓶中，用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，洗涤液也转移到容量瓶中，轻轻摇动，用玻璃棒引流，加水定容至100ml，室温密闭存放。4.2.3.2×SSC(1L)洗液配制：
4.2.3.2.加入800ml去离子水加热溶解。
4.2.3.3.待溶液冷却至室温，加入数滴1mol/LHCl调pH至7.0-7.2。
4.2.3.4.把溶液转移到经检查过的1L容量瓶中，用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，洗涤液也转移到容量瓶中，轻轻摇动，用玻璃棒引流，加水定容至1L，室温密闭存放。
4.2.4.0.2×SSC(1L)洗液配制：
4.2.4.1.量取10ml20×SSC与10ml10%SDS于1L的烧杯中。4.2.4.2.加入800ml去离子水加热溶解。
4.2.4.3.待溶液冷却至室温，加入数滴1mol/LHCl调pH至7.0-7.2。
4.2.3.4.把溶液转移到经检查过的1L容量瓶中，用少量蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2-3次，洗涤液也转移到容量瓶中，轻轻摇动，用玻璃棒引流，加水定容至1L，室温密闭存放。
4.3.EDC(10×)配制：
4.3.1.在干燥环境中用电子天平精密称取适量的EDC粉末于离心管中。4.3.2.按EDC(mg)：灭菌水(ml)=1：5的比例向装有EDC粉末的离心管中精确加入灭菌水。
4.3.3.将装有EDC粉末和灭菌水的离心管竖直放置在涡旋混合器上混合均匀，然后于离心机上离心，室温放置(现用现配)。
4.4.HB(2×)配制：
4.4.1.方法一：
4.4.1.1.用适当规格的移液枪按以下体系依次准确移取试剂于离心管中。
20×SSC10%SDSFormamide
10mg/mlSalmonDNA灭菌水
2.5ml200μl5ml100ul2.2ml
4.4.1.2.将装有样品的离心管竖直放置在涡旋混合器上混合均匀，然后于离心机上离心。
4.4.1.3.于无菌操作台分装HB至1.5ml离心管中，-20℃保存备用。4.4.2.方法二：
4.4.2.1.在干燥环境下用电子天平精确称取0.8765gNaCl和0.441g柠檬酸三钠·2H2O于10ml烧杯中，加入不超过5ml(约3ml)灭菌水，用玻璃棒搅拌，待溶解后调节PH至7.0。
4.4.2.2.在干燥环境下用电子天平精确称取0.02gSDS和0.001g鲑鱼精DNA于烧杯中。
4.4.2.3.用1000ul移液枪准确移取5mlFormimade于烧杯中，玻璃棒搅拌均匀。4.4.2.4.将烧杯中的液体转移至10ml容量瓶，用少量灭菌水洗涤烧杯和玻璃棒2~3次，洗涤液也转移至容量瓶中，轻轻摇动，用玻璃棒引流，加灭菌水定容至10ml。
4.4.2.5.于无菌操作台分装HB至1.5ml离心管中，-20℃保存备用。
4.5.模板点样液配制
4.5.1.按以下体系移取试剂于离心管中。
EDCMESDNA(100μM)H2OTotal
1μl5μl1μl3μl10μl
DNA终浓度10μM。
4.5.2.将装有样品的离心管竖直放置在涡旋混合器上混合均匀，然后于离心机上离心，室温放置待用。
生物试剂篇三：常用生物试剂配制方法
常用生物试剂配制方法（buffer）
实验室各种缓冲液的配方
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸（TAE）缓冲液终浓度配制1L溶液
成分各成分的用量
2mol/LTris碱242g
1mol/L冰乙酸57.1ml
EDTA（pH＝8.0）18.622g（200ml的0.5mol/LEDTA（pH8.0））水补足1L
5×Tris-硼酸（TBE）缓冲液
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量
445mmol/LTris碱54g
445mmol/L硼酸盐27.5g硼酸
10mmol/LEDTA20ml的0.5mol/LEDTA（pH8.0）水补足1L
染料
1％溴酚蓝（bromophenolblue）
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1％二甲苯青FF（xylenecyanoleFF）
溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。
10mg/ml的.溴化乙锭（ethidiumbromide）
小心称取1g溴化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4℃贮存。
凝胶上样液（gelloadingsolutions）
6×碱性凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.3N氢氧化钠300ul10N氢氧化钠6mmol/LEDTA120ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）
18％聚蔗糖（400型）1.8g
0.15％溴甲酚绿15mg
0.25％二甲苯青FF25mg
水补足到10ml
6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15％溴酚蓝1.5ml1％溴酚蓝
0.15％二甲苯青FF1.5ml1％二甲苯青FF
5mmol/LEDTA100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）
15％聚蔗糖（400型）1.5g
水补足到10ml
6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.25％溴酚蓝2.5ml1％溴酚蓝
0.25％二甲苯青FF2.5ml1％二甲苯青FF
15％聚蔗糖（400型）1.5g
水补足到10ml
6×甘油凝胶上样液（4℃贮存）
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15％溴酚蓝1.5ml1％溴酚蓝
0.15％二甲苯青FF1.5ml1％二甲苯青FF
5mmol/LEDTA100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）
50％甘油3ml
水3.9ml
6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15％溴酚蓝1.5ml1％溴酚蓝
0.15％二甲苯青FF1.5ml1％二甲苯青FF
5mmol/LEDTA100ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）
40％聚蔗糖4g
水补足到10ml
10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.2％溴酚蓝20mg
0.2％二甲苯青FF20mg
200mmol/LEDTA4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)
0.1％SDS100ul10％SDS
50％甘油5ml
水补足到10ml
0.5mol/LEDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA"2H2O和20g的NaOH(调节pH＝8.0)，并溶于水中，定容至1L。
0.5mol/LEDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA"2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。1mol/LMgCl2:溶解20.3gMgCl2"6H2O于足量的水中，定容到100ml。
10mg/mlRnase（无DNase）（DNase－freeRNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于
1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中（pH5.0）。溶解后于水浴中煮沸15min，使DNA酶失活。用1mol/L的Tris－HCl调pH至7.5，于-20℃贮存。（配制过程中要戴手套）
10N氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。
10％SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
10×标准DNA连接酶缓冲液（standardDNAligasebuffer）（粘端、平端连接）成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量
0.5mol/LTris-HCl:5ml1mol/L贮液,100mmol/LMgCl2:1ml1mol/L贮液,100mmol/LDTT:1ml1mol/L贮液,2mmol/LATP:200ul100mmol/L贮液,5mmol/L盐酸亚精胺（可选）:50ul1mmol/L贮液,0.5mg/mlBSA（组分V）（可选）:0.5ml10mg/mL贮液,水:2.25ml将配制好的缓冲液分装成小份，贮存于-20℃。
DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水
加100ulDEPC于100ml水中，使DEPC的体积分数为0.1％。在37℃温浴至少12h，然后在15psi条件下高压灭菌20min，以使残余的DEPC失活。DEPC会与胺起反应，不可用DEPC处理Tris缓冲液。
TE（用于悬浮和贮存DNA）
成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量
10mmol/LTris－HCl1ml1mol/LTris-HCl（pH7.4(转载于:mol/LEDTA200ul0.5mol/LEDTA（pH8.0）
水98.8ml
Tris缓冲液（Tris-HClbuffer）
将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中，再根据所要求的pH（25℃下）加一定量的浓盐酸（11.6N），用水调整终体积至1L。
浓盐酸的体积（ml）pH
8.69.0
148.8
218.6
28.58.4
388.2
468.0
567.8
667.6
71.37.4
767.2
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